人EPO高效表达细胞株的筛选与鉴定

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【摘要】

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用氨甲喋呤(MTX)对稳定转染人促红细胞生成素(EPO)基因的CHO^-(DHFR缺陷型)细胞株进行梯度加压，并使用α-MEM培养基进行培养，使DHFR基因在CHO^-细胞中大量扩增，从而使EPO的表达

【作者】

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孙丽翠刘芃芃刘维全张玉国齐顺章祁雅慧

【机构】

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中国农业大学生物学院,首都医科大学实验中心

【出处】

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生物技术

【发表日期】

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2004年5期

【关键词】

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EPO 高效表达细胞株 MTX 鉴定 EPO highly-expressing cell strain MTX Identification

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目 (3950 0 0 84)

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用氨甲喋呤(MTX)对稳定转染人促红细胞生成素(EPO)基因的CHO^-(DHFR缺陷型)细胞株进行梯度加压，并使用α-MEM培养基进行培养，使DHFR基因在CHO^-细胞中大量扩增，从而使EPO的表达量提高。经检测分析EPO的表达量，筛选出EPO高效表达的细胞株。结果表明，用MTX加压到16×10^-7mol/L和64×10^-7mol/l浓度时，收集的细胞培养液经(NH4)2SO4盐析、透析等处理得到EPO抽提液，经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测出与标准品相对应

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