加工过的假基因影响RT─PCR的可靠性

来源 :重庆医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lyh555
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为了探讨加工过的假基因对RT-PCR的干扰以及克服的方法,运用BT-PCR技术扩增各种组织中的β-actin基因序列。通过设立各种对照可以发现加工过的假基因的存在,在RNA中残存有0.1%的DNA均可引起其结果的假阳性。哺乳类动物中加工过的假基因可能普遍存在,在cDNA合成前用DNase消化RNA样品,对于提高RT-PCR的可靠性极为重要。 In order to investigate the interference of processed pseudogenes on RT-PCR and to overcome it, BT-PCR was used to amplify the β-actin gene sequences in various tissues. Through the establishment of a variety of control can be found in the presence of processed pseudo-genes, RNA remaining in the DNA 0.1% can cause false positive results. It is possible that pseudogenes processed in mammals may be ubiquitous. Digesting RNA samples with DNase prior to cDNA synthesis is extremely important for improving the reliability of RT-PCR.
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