【摘 要】
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DNS-Cl与蛋白质或多肽的α-氨基反应后,用酸水解,生成有萤光的DNS-氨基酸,其检出灵敏度比FDNB法(Fluoro dinitrobenzene)高100倍。但此法是在105°~110℃下用5.7NHCl水解,因
【机 构】
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中国科学院上海有机化学研究所天花粉小组,
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DNS-Cl与蛋白质或多肽的α-氨基反应后,用酸水解,生成有萤光的DNS-氨基酸,其检出灵敏度比FDNB法(Fluoro dinitrobenzene)高100倍。但此法是在105°~110℃下用5.7NHCl水解,因此不能区别Gln与Glu,Asn与Asp,并且水解时Trp被破坏。另外在用聚酰胺薄膜鉴定DNS-氨基酸时杂点比较多,有时难以鉴别。现在采用的DABITC法测末端比DNS法优越。 (2)材料: dansyl—chloride;2.5mg DNS——Cl溶于1ml丙酮中。 0.1M NaHCO_3双蒸水溶液. DNS-玻璃管(5×0.5cm直径),于500℃处理. 干燥器,45℃热板和105℃烘箱及油泵.
After reacting with the α-amino group of a protein or polypeptide, DNS-Cl is acid-hydrolyzed to generate a fluorescent DNS-amino acid with a detection sensitivity of 100-fold higher than that of FDNB method (Fluoro dinitrobenzene). However, this method is hydrolyzed with 5.7N HCl at 105 ° -110 ° C, so Gln and Glu, Asn and Asp can not be discriminated, and Trp is destroyed when hydrolyzed. In addition, the identification of DNS-amino acids with polyamide films is more problematic and sometimes difficult to identify. DABITC method is now used to measure the end than DNS superior. (2) Material: dansyl-chloride; 2.5 mg DNS - Cl in 1 ml acetone. 0.1M NaHCO 3 double distilled water solution DNS-glass tube (5 × 0.5cm in diameter) and treated at 500 ℃ Dryer, 45 ℃ hot plate and 105 ℃ oven and oil pump.
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