【摘 要】
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藻蓝蛋白荧光强度的控制对于荧光探针在疾病治疗中的有效应用具有重要意义,本研究对藻蓝蛋白的分子大小对其紫外吸收和荧光强度的影响进行了探究.在SB9缓冲液中,将等量的藻蓝
【机 构】
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内蒙古农业大学生命科学学院,内蒙古自治区植物逆境生理与分子生物学重点实验室,呼和浩特,010018;河南工业大学粮油食品学院,小麦和玉米深加工国家工程实验室,郑州,450000
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藻蓝蛋白荧光强度的控制对于荧光探针在疾病治疗中的有效应用具有重要意义,本研究对藻蓝蛋白的分子大小对其紫外吸收和荧光强度的影响进行了探究.在SB9缓冲液中,将等量的藻蓝蛋白在9种梯度浓度1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)的作用下交联,琼脂糖凝胶电泳出现明显的分离条带.随后,检测这些交联的藻蓝蛋白的紫外线吸收和荧光强度.结果 表明:与对照相比,EDC浓度越小,形成的交联藻蓝蛋白分子量越小;而随着交联藻蓝蛋白分子量减小,其最高吸收峰向波长较长的区域移动(称为红移),并且其荧光强度增加.另外,用1 mol/mL的胰蛋白酶处理藻蓝蛋白小分子,每隔一段时间检测其紫外吸收和荧光强度,得出动力学吸收光谱和动力学荧光光谱.结果 表明:与对照相比,酶切时间越长,最高吸收峰波长红移,荧光强度越弱.随后,对酶切的藻蓝蛋白进行琼脂糖凝胶电泳,观察到明显的分离带;聚丙烯酰胺凝胶电泳,检测到明显的荧光强度差异.以上结果证明藻蓝蛋白被酶切成小分子.综上,藻蓝蛋白的分子大小对其紫外吸收和荧光强度有显著影响,值得更多的研究关注.
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