【摘 要】
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目的 观察Krüppel样转录因子8(KLF8)在乳腺癌组织及乳腺癌细胞中的表达情况并探讨其表达的临床意义.方法 ①运用Oncomine数据库挖掘KLF8 mRNA在乳腺癌组织中差异表达的数据并通过Kaplan-Meier Plotter数据库在线分析乳腺癌患者KLF8 mRNA的表达情况及其与乳腺癌患者预后(无复发生存、总生存、后进展生存、无远处转移生存)的关系;②通过实时定量PCR (qRT-PCR)技术及Western blot方法检测KLF8在16例临床乳腺癌患者及7种乳腺癌细胞系(MDA-MB-
【机 构】
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郑州大学第二附属医院肿瘤科 郑州450014;郑州大学附属洛阳中心医院放疗科 河南洛阳471009;洛阳市肿瘤临床诊疗研究中心 河南洛阳471009
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目的 观察Krüppel样转录因子8(KLF8)在乳腺癌组织及乳腺癌细胞中的表达情况并探讨其表达的临床意义.方法 ①运用Oncomine数据库挖掘KLF8 mRNA在乳腺癌组织中差异表达的数据并通过Kaplan-Meier Plotter数据库在线分析乳腺癌患者KLF8 mRNA的表达情况及其与乳腺癌患者预后(无复发生存、总生存、后进展生存、无远处转移生存)的关系;②通过实时定量PCR (qRT-PCR)技术及Western blot方法检测KLF8在16例临床乳腺癌患者及7种乳腺癌细胞系(MDA-MB-231、MCF-12A、Hs-578T、MCF-7、BT-474、MDA-MB-453、ZR-75-30)和人正常乳腺上皮细胞系MCF-10A中的表达情况,并进一步采用免疫荧光技术检测KLF8表达量较高的2种乳腺癌细胞系中的表达定位情况;③通过一张包含135例乳腺癌组织的组织芯片,采用免疫组织化学方法检测KLF8蛋白表达情况并分析其与乳腺癌患者临床病理特征及总生存情况的关系.结果 ①Oncomine数据库的数据显示,KLF8 mRNA在乳腺癌组织中的表达高于正常乳腺组织(P＜0.001);在Kaplan-Meier Plotter数据库中的数据在线分析结果显示,KLF8 mRNA低表达(以KLF8 mRNA表达水平的中位数为截点分组)患者的预后情况(无复发生存、总生存、后进展生存、无远处转移生存)均优于高表达患者(P＜0.05).②在16例乳腺癌及其相应的癌旁正常组织中,qRT-PCR和Western blot检测结果均显示在乳腺癌组织中KLF8 mRNA和蛋白表达水平均高于其相应的癌旁正常组织(P=0.002,P＜0.001).此外,Westernblot法检测KLF8蛋白在7种乳腺癌细胞系中的表达均高于正常乳腺上皮细胞系且其以胞浆表达为主,仅在少数细胞中以核表达为主.③在乳腺癌组织芯片中的135例患者中KLF8蛋白高表达63例、低表达72例(以免疫组织化学检测结果的H-Score评分75分为截点,＞75分为KLF8蛋白高表达,反之则为KLF8蛋白低表达),二者的雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)状态比较差异有统计学意义(P＜0.05),且Kaplan-Meier生存曲线分析显示KLF8蛋白高表达患者的预后情况劣于KLF8蛋白低表达患者(P=0.002),单因素分析结果发现乳腺癌患者的TNM分期、ER和PR状态及KLF8蛋白表达情况与患者预后有关(P＜0.05),进一步的Cox比例风险回归多因素分析结果提示TNM分期晚及KLF8蛋白高表达是乳腺癌患者预后生存的独立危险因素(P＜0.05).结论 从本研究初步研究结果提示,KLF8在乳腺癌组织及乳腺癌细胞中均呈高表达,其与乳腺癌患者的ER和PR状态及预后生存有一定的关系,其有可能作为促癌基因参与了乳腺癌的进展,或许可为乳腺癌预后判断及分子靶向治疗提供新的切入点.
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