【摘 要】
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目的 呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)对人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBECs)凋亡和炎性因子表达的影响及可能机制.方法 体外培养HB
【机 构】
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210000江苏南京,南京医科大学附属儿童医院呼吸科;南京医科大学附属南京儿童医院康复医学科
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目的 呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)对人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBECs)凋亡和炎性因子表达的影响及可能机制.方法 体外培养HBECs,分别转染miR-409-3p抑制剂、SIRT1过表达载体或共转染miR-409-3p抑制剂与SIRT1小干扰RNA后,采用RSV感染进行转染,然后RT-qPCR法检测细胞中miR-409-3p和SIRT1 mRNA表达水平,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western Blot检测细胞中Ki-67、p21、Bcl-2和Bax蛋白表达,试剂盒法检测细胞培养上清液中IL-6和TNF-α表达水平.双荧光素酶报告基因实验验证SIRT1和miR-409-3p调控关系.结果 RSV感染促进HBECs细胞中miR-409-3p的表达(P＜0.05),而抑制SIRT1表达(P＜0.05),降低HBECs细胞增殖活性及细胞中Ki-67和Bcl2的蛋白表达(P＜0.05),促进HBECs凋亡及细胞中p21和Bax的蛋白及IL-6和TNF-α表达(P＜0.05).沉默miR-409-3p或过表达SIRT1可提高RSV感染的HBECs增殖活性及细胞中Ki-67和Bcl2的蛋白表达(P＜0.05),而抑制细胞凋亡率、p21和Bax的蛋白及IL-6和TNF-α表达(P＜0.05).miR-409-3p靶向负调控SIRT1表达.沉默SIRT1逆转了沉默miR-409-3p对RSV感染的HBECs增殖、凋亡及炎性因子IL-6和TNF-α表达的影响(P＜0.05).结论 呼吸道合胞病毒通过调控miR-409-3p/SIRT1通路促进支气管上皮细胞凋亡与炎症因子表达.
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