【摘 要】
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二分浓核病毒(bidensovirus,BDV)是家蚕病毒病的主要病原之一.为了筛选和鉴定家蚕体内与BDV感染相关的差异表达microRNA (miRNA),对家蚕品种JS的3龄起蚕添食BDV,36 h后收集家
【机 构】
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江苏科技大学生物技术学院,江苏镇江212018
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二分浓核病毒(bidensovirus,BDV)是家蚕病毒病的主要病原之一.为了筛选和鉴定家蚕体内与BDV感染相关的差异表达microRNA (miRNA),对家蚕品种JS的3龄起蚕添食BDV,36 h后收集家蚕并提取总RNA,采用高通量测序技术分析家蚕感染BDV后应答的miRNA,从中筛选出24个显著差异表达的miRNA,其中14个为已知miRNA,10个为新发现的miRNA.进一步利用反转录PCR(RT-PCR)技术对上述24个miRNA进行验证,发现这些miRNA均在家蚕幼虫体内表达;利用实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测家蚕感染BDV后这些miRNA的表达情况,发现其中9个miRNA表达上调,15个miRNA表达下调,其中表达上调倍数最高的为bmo-miR-1923,相对表达上调了8.87倍,表达下调倍数最高的为bmo-miR-13b-3p,相对表达下调了6.97倍.此外,根据测序结果进行生物信息学预测和分析差异表达miRNA的靶基因,并利用GO分析对靶基因进行功能分类,发现这些靶基因主要参与了细胞过程、催化、结合和代谢过程.研究结果将为阐明家蚕抗BDV的分子机制提供数据参考和技术支持.
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