探讨内质网应激在氟化物诱导人肝癌细胞HepG2凋亡机制中的作用。
方法体外培养HepG2细胞24 h，分别采用1、3、6、9 mmol/L氟化物(NaF)处理细胞24 h，对照组细胞正常培养。流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况；提取3 mmol/L NaF处理组细胞RNA和蛋白，实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹方法检测HepG2细胞中内质网应激反应标志物葡萄糖调节蛋白GRP78、GRP94和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)mRNA和蛋白的表达。
结果NaF处理HepG2细胞24 h，对照组及1、3、6、9 mmol/L NaF处理组细胞凋亡率分别为(6.25±1.27)%、(13.48±1.00)%、(24.08±1.88)%、(30.19±3.07)%、(37.72±4.43)%，各组间细胞凋亡率比较差异有统计学意义(F= 65.828，P < 0.01)。3 mmol/L NaF处理HepG2细胞24 h，GRP78、GRP94和CHOP mRNA表达[(1 172.41±459.60)%、(946.95±635.85)%、(7 846.97±1 670.01)%]均高于对照组[(100.00±1.77)%、(100.00±2.08)%、(100.00±0.74)%，t= 12.77、4.67、11.50，P均< 0.01] ；GRP78和CHOP蛋白表达[(159.99±67.59)%、(155.15±94.24)%]均高于对照组[(100.00±30.68)%、(100.00±41.44)%，t=-3.27、-1.99，P均< 0.05]，GRP94蛋白表达[(46.40±41.46)%]低于对照组[(100.00±68.86)%，t= 4.02，P< 0.05]。
结论内质网应激反应参与了氟化物诱导HepG2细胞凋亡发生的病理过程。