2型猪链球菌表面蛋白Hp0272的原核表达及其结合人血清IgA的活性分析

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目的:构建带GST标签的2型猪链球菌功能未知表面蛋白Hp0272的原核表达质粒并在大肠杆菌中表达,获得纯度较高的GST-Hp0272重组融合蛋白,鉴定其与人血清IgA(higA)的结合活性。方法:采用分子生物学方法构建pGEX-4T-1-0272重组表达载体,将其转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株,IPTG诱导表达后,通过SDS-PAGE分析蛋白表达情况;用GSTrap柱亲和纯化目的蛋白并经Western印迹验证,采用配体印迹和ELISA方法鉴定GST-Hp0272与hlgA的结合活性。结果:构建了GST
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