重组逆转录病毒质粒pLNCX／iNOS的构建

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【摘要】

：

构建含一氧化氮合酶(iNOS)基因的重组逆转录病毒pLNCX/iNOS质粒.方法用PCR技术从pCMV/iNOS质粒中扩增出iNOS全长DNA,用限制性内切酶Hind Ⅲ和Cla Ⅰ对iNOSDNA和逆转录病毒质

【作者】

：

朱梁军潘英陈宝安

【机构】

：

210009江苏省肿瘤医院,南京军区军事医学研究所,东南大学医学院附属中大医院

【出处】

：

江苏医药

【发表日期】

：

2002年1期

【关键词】

：

一氧化氮合酶逆转录病毒基因转染聚合酶链式反应肿瘤 NitricoxidesynthaseRetroviralvectorGenetransfection

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构建含一氧化氮合酶(iNOS)基因的重组逆转录病毒pLNCX/iNOS质粒.方法用PCR技术从pCMV/iNOS质粒中扩增出iNOS全长DNA,用限制性内切酶Hind Ⅲ和Cla Ⅰ对iNOSDNA和逆转录病毒质粒pLNCX分别进行双酶切.在T4连接酶的作用下,构建重组逆转录病毒质粒pLNCX/iNOS;用脂质体介导的方法把重组质粒DNA转染进入包装细胞PA317中,经过G418筛选出抗性克隆.通过NIH3T3细胞测定病毒液的病毒滴度.结果经过酶切分析证实PCR扩增的iNOSDNA基因序列与鼠源性iNOS

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