【摘 要】
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目的 考察人参皂苷Rh2对人非小细胞肺癌A549及H460细胞增殖的影响,并进一步探讨其作用机制.方法 人参皂苷Rh2处理A549及H460细胞,采用CCK-8法及克隆形成实验检测药物对细胞增殖的作用;观察药物对细胞形态的影响,利用Annexin V-FITC/碘化丙啶(PI)双染法检测细胞凋亡情况;利用乳酸检测试剂盒检测药物对细胞糖酵解产物即乳酸生成的影响;采用Western blotting法检测药物对线粒体凋亡蛋白[B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋
【机 构】
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吉林省肿瘤医院博士后科研工作站,吉林长春130012;长春中医药大学中医学院,吉林长春130117;吉林省肿瘤医院肿瘤转化医学实验室,吉林长春130012;吉林省肿瘤医院胸部肿瘤内科,吉林长春1300
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目的 考察人参皂苷Rh2对人非小细胞肺癌A549及H460细胞增殖的影响,并进一步探讨其作用机制.方法 人参皂苷Rh2处理A549及H460细胞,采用CCK-8法及克隆形成实验检测药物对细胞增殖的作用;观察药物对细胞形态的影响,利用Annexin V-FITC/碘化丙啶(PI)双染法检测细胞凋亡情况;利用乳酸检测试剂盒检测药物对细胞糖酵解产物即乳酸生成的影响;采用Western blotting法检测药物对线粒体凋亡蛋白[B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)],糖酵解调节通路信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)/c-myc及糖酵解途径关键酶丙酮酸激酶M2 (pyruvate kinase M2,PKM2)、乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)表达的影响.上调c-myc表达后,观察人参皂苷Rh2对A549及H460细胞乳酸水平的影响.结果 人参皂苷Rh2可明显抑制A549及H460细胞的增殖能力及克隆形成能力(P＜0.05、0.01、0.001),呈剂量和时间相关性.人参皂苷Rh2明显改变A549及H460细胞形态并诱导细胞凋亡(P＜0.05),显著降低乳酸生成量(P＜0.05、0.01).人参皂苷Rh2可显著下调Bcl-2/Bax、PKM2、LDHA蛋白表达水平(P＜0.05、0.01),上调Caspase-3蛋白表达水平(P＜0.05),并抑制STAT3/c-myc通路活性(P＜0.05、0.01).上调c-myc表达后,人参皂苷Rh2对A549及H460细胞乳酸水平的抑制作用减弱(P＜0.05、0.01).结论 人参皂苷Rh2显著抑制A549及H460细胞的增殖,其机制可能是通过调控线粒体凋亡蛋白、抑制STAT3/c-myc通路及糖酵解关键酶的表达干扰糖酵解,最终导致细胞凋亡.
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