银染巢式RT-PCR检测胃癌淋巴结微转移方法

来源 :厦门大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:guorui146105
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以Keratin19cDNA的套式引物建立了巢式RT-PCR扩增Keratin19mRNA的体系及PAGE-银染检测扩增产物的方法;对扩增体系进行优化后,分析了扩增特异性及检测敏感性,并对临床样品作了初步检测.结果表明:该扩增体系具有较好的特异性,其敏感性可达10-6μgRNA,即可从105个淋巴细胞中检出1个胃癌细胞;对临床样品检测的结果与病理检查结果相符.显示该法具有较好的可靠性. A nested RT-PCR amplification system for Keratin19 mRNA and a PAGE-silver staining amplification product were set up using Keratin19 cDNA nested primers. After the amplification system was optimized, amplification specificity and detection sensitivity were analyzed. Preliminary testing of clinical samples. The results show that the amplification system has good specificity and its sensitivity can reach 10-6μgRNA, and one gastric cancer cell can be detected from 105 lymphocytes. The results of clinical samples are consistent with the results of pathological examination. Show that this method has a better reliability.
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