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为了在二维凝胶电泳（2-DE）中有效分离牛乳中的碱性蛋白，本试验在等电聚焦上样缓冲液中加入异丙醇和甘油，采用杯上样方式，比较了三丁基磷（TBP）和二硫苏糖醇（DTT）两种还原剂对碱性区域蛋白的分离效果。结果发现，等电聚焦上样缓冲液以TBP为还原剂的碱性蛋白分离图谱水平条纹少，优于以DTT为还原剂图谱。表明等电聚焦上样缓冲液以TBP为还原剂。采用杯上样的方法可以改善牛乳中碱性蛋白的分离效果。