野生型p53及相关调控基因的转录、翻译水平与肠道干细胞分化的关系

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目的探讨野生型p53(wtp53)基因及其相关调控基因转录、翻译水平的变化与肠道干细胞分化的关系.方法利用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学技术,以细胞分化标志肝脂肪酸结合蛋白(L-Fabp)mRNA水平为动态参照,分别检测大鼠胚胎期E14 d,E17 d,E19 d和幼鼠期P1 d,P2 d,P7 d,P28 d及成年大鼠小肠细胞内p53 mRNA、p21 mRNA及其蛋白表达.结果从胚胎E19 d至成年大鼠,RT-PCR能够检测到小肠细胞内L-Fabp的mRNA,其中P2 d,L-Fabp的mRNA含量最高,证实这个期间为肠道干细胞高分化阶段.从胚胎到成年大鼠,小肠细胞p21 mRNA及其蛋白表达均为阴性,p53 mRNA水平无明显变化.然而从E14 d~P2 d,小肠上皮细胞p53蛋白信号呈逐渐增强趋势.P7 d以后至成年期,p53蛋白信号为阴性.结论在肠道干细胞迅速分化期,p53蛋白高表达可能是因为其半衰期延长,最终导致蛋白量累积的结果,而与转录水平无关,提示蛋白的稳定性对于p53调节肠道干细胞分化期基因的稳定性十分重要,另外,p53蛋白调节肠道干细胞的分化机制与p21途径无关.

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