【摘 要】
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针对病原性大肠埃希氏菌EHEC和EPEC的毒力基因eaeA和rfbE,选用特异性引物,建立了实时荧光定量PCR检测方法.利用从污水中分离出的目的核酸片段构建重组质粒,通过测序和BLAST比
【机 构】
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西安建筑科技大学环境与市政工程学院西北水资源与环境生态教育部重点实验室,清华大学国家环境保护环境微生物利用与安全控制重点实验室
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针对病原性大肠埃希氏菌EHEC和EPEC的毒力基因eaeA和rfbE,选用特异性引物,建立了实时荧光定量PCR检测方法.利用从污水中分离出的目的核酸片段构建重组质粒,通过测序和BLAST比对分析,确定了PCR扩增的特异性.将重组质粒作为模板,分别测定标准曲线,在eaeA基因模板量8.77～8.77×105copy,rfbE基因模板量4.98～4.98×105copy的范围内,Ct（循环阈值）与模板量的对数值具有良好的线性关系〔R2为0.997（eaeA）和1.000（rfbE）〕.结合
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