【摘 要】
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目的观察早期骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞中miRNA-140的表达规律以及转染ds-miRNA-140对软骨细胞功能的影响。方法建立兔OA模型,获得正常软骨细胞(A组)和4周(B组)、
【机 构】
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北京积水潭医院; 北京大学第四临床医学院矫形科; 第三军医大学新桥医院骨科;
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目的观察早期骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞中miRNA-140的表达规律以及转染ds-miRNA-140对软骨细胞功能的影响。方法建立兔OA模型,获得正常软骨细胞(A组)和4周(B组)、8周(C组)OA软骨细胞,应用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测各组miRNA-140相对表达量以及Ⅱ型胶原蛋白(Col2a1)和金属蛋白酶13(MMP-13)的表达情况。各组软骨细胞转染ds-miRNA-140后,观察细胞Col2a1、MMP-13的表达情况。结果 B组、C组软骨细胞miRNA-140的表达和A组相比分别下降到63%和57%(P<0.01),而B组和C组软骨细胞miRNA-140的表达差异无统计学意义(P>0.05);B、C两组细胞Col2a1mRNA的表达和A组相比分别减少了52%和63%(P<0.01),B、C两组软骨细胞MMP-13mRNA的表达和A组相比分别升高了3.01倍和4.15倍(P<0.01)。转染ds-miRNA-140后,B、C两组细胞Col2a1mRNA的表达分别增加了60%和127%(P<0.01),B、C两组MMP-13mRNA的表达在转染后是转染前的54.53%和42.61%(P<0.01)。Col2a1和MMP-13蛋白表达水平变化趋势与mRNA一致。结论 OA早期关节软骨miRNA-140的表达显著减少;转染ds-miRNA-140可增加软骨细胞Col2a1表达,同时降低MMP-13的表达。
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