【摘 要】
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研究在已有的新城疫病毒La Sota株反向遗传系统的基础上,利用新城疫病毒La Sota株作为表达载体,构建表达牛α干扰素(bovine interferonα)完整开放阅读框的全基因组质粒pFL-B
【机 构】
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东北林业大学; 黑龙江省农业科学院畜牧研究所; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室; 内蒙古农业大学动物科学与医学学院;
【基金项目】
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国家“973”项目(2005CB523200);中国博士后科学基金项目(20070410275);黑龙江省博士后基金项目(LBH-206242)
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研究在已有的新城疫病毒La Sota株反向遗传系统的基础上,利用新城疫病毒La Sota株作为表达载体,构建表达牛α干扰素(bovine interferonα)完整开放阅读框的全基因组质粒pFL-BoIFNα,转染BHK-21细胞获得表达牛α干扰素重组新城疫病毒。采用RT-PCR方法检测,证实收获的鸡胚尿囊液内的重组病毒含有相应外源基因。将重组病毒尿囊液经紫外线照射灭活新城疫病毒,利用表达绿色荧光蛋白的重组水泡性口炎病毒(VSV-EGFP)在牛肾细胞(MDBK)上测定rL-BoIFNα抗病毒活性,证实表达牛干扰素的重组新城疫病毒尿囊液能有效抑制VSV-EGFP在牛肾细胞上的复制,rL-BoIFNα接种SPF鸡胚所收尿囊液抗病毒活性高达2×107IU/mL。结果表明:牛α干扰素在重组新城疫病毒rL-BoIFNα接种的SPF鸡胚尿囊液中获得良好表达,并具有高效而稳定的抗病毒活性。
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