目的 观察微小RNA (miR)-200a在胰腺癌干细胞中的表达,探讨miR-200a在胰腺癌上皮-间充质转化(EMT)过程中的作用.方法 采用流式分析法从胰腺癌细胞株PANC-1中分选出C D24+ CD44+上皮特异性抗原(ESA)+三阳性的胰腺癌干细胞(PCSCs),通过逆转录实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测PCSCs中miR-200a的表达,通过miR-200a inhibitor转染PANC-1细胞抑制其表达水平,检测miR-200a表达与EMT相关性.结果 PCSCs显示EMT表型,并且其miR-200a的表达(1.0000 ±0.353 0)显著低于PANC-1细胞中miR-200a表达(0.237 1 ±0.107 1).PCSCs呈现EMT相关表型.转染miR-200a inhibitor后PANC-1细胞EMT特征基因的表达发生了改变,N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和转录抑制因子锌指E-盒结合同源异形盒(ZEB1) mRNA的表达显著升高,而E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达显著降低.miR-200a抑制组、PANC-1对照组以及转染无意义序列组E-cadherin表达分别为0.356 0±0.201 0、1.000 0±0.150 0和1.100 0±0.200 0;N-cadherin表达分另别为2.890 0±0.225 0、1.000 0±0.260 0和0.850 0±0.240 0;ZEB1表达为3.840 0±0.480 0、1.000 0±0.160 0和0.9400 ±0.1400;Vimentin表达分别为3.7500±0.4100、0.9186±0.2100和1.2000±0.1800.PANC-1细胞形态明显向间质细胞形态发生转变.同时,抑制miR-200a表达显著提高了PANC-1的侵袭和迁移能力,分别比对照组升高3.4和2.8倍.结论 miR-200a可能参与胰腺癌EMT过程的调节。
抑制微小RNA-200a表达对胰腺癌上皮-间充质转化过程的影响
【摘 要】
：
目的 观察微小RNA (miR)-200a在胰腺癌干细胞中的表达,探讨miR-200a在胰腺癌上皮-间充质转化(EMT)过程中的作用.方法 采用流式分析法从胰腺癌细胞株PANC-1中分选出C D24+ CD44+上皮特异性抗原(ESA)+三阳性的胰腺癌干细胞(PCSCs),通过逆转录实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测PCSCs中miR-200a的表达,通过miR-200a inhibito
【机 构】
：
226001江苏,南通大学附属医院外科综合实验室,226001江苏,南通大学附属医院外科综合实验室,226001江苏,南通大学附属医院外科综合实验室,226001江苏,南通大学附属医院外科综合实验室,
【出 处】
：
中华实验外科杂志
【发表日期】
：
2014年31期
论文部分内容阅读
其他文献
目的 探讨热休克蛋白90(HSP90)-细胞外信号调节激酶(ERK)-血管内皮生长因子(VEGF)信号通路在肠癌所致血管内皮细胞迁移和管状生成中作用及可能机制.方法 改变肠癌细胞HCT116中HSP90的表达水平,观察对下游分子ERK磷酸化激活和VEGF表达的影响;肠癌细胞条件培养上清刺激人脐静脉血管内皮(HUVECs)细胞,观察HUVECs细胞在该培养液中迁移和管状生成的能力;同时采用ERK抑制