微小RNA-205靶向调控单羧酸转运蛋白1对结直肠癌细胞乳酸水平和增殖能力的影响

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目的

探讨微小RNA(miRNA,miR)-205靶向调控单羧酸转运蛋白1(MCT1)对结直肠癌细胞乳酸水平和增殖能力的影响。

方法

选取2017年6月至2019年6月新乡市中心医院收集的280例结直肠癌和对应癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分析miR-205和MCT1表达水平;采用慢病毒介导对照miRNA和miR-205感染SW480结直肠癌细胞系,构建miRNA对照组和miR-205组细胞系,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析两组细胞增殖能力;采用比色法测定肿瘤组织和两组细胞胞内乳酸水平;采用碘化丙锭测定两组细胞周期;采用双荧光素酶报告基因分析miR-205靶基因;采用Western blot分析两组细胞增殖和周期相关蛋白的表达水平。应用SPSS 17.0统计学软件分析,符合正态分布的以均数±标准差表示,组间比较采用t检验。

结果

癌旁组织miR-205表达水平(1.22±0.19)明显高于结直肠癌组织(0.51±0.11),差异有统计学意义(t=4.991,P<0.05)。癌旁组织MCT1蛋白相对表达水平(0.87±0.17)明显低于结直肠癌组织(2.72±0.23),差异有统计学意义(t=5.198,P<0.05)。癌旁组织乳酸水平[(1.97±0.24) mmol/L]明显低于结直肠癌组织[(4.71±0.87) mmol/L],差异有统计学意义(t=3.718,P<0.05)。miRNA对照组细胞乳酸水平[(2.76±0.82) mmol/L]明显高于miR-205组[(1.20±0.18) mmol/L],差异有统计学意义(t=3.338,P<0.05)。miRNA对照组细胞吸光度值[(1.86±0.64)]明显高于miR-205组[(1.23±0.39)],差异有统计学意义(t=3.011,P<0.05)。miRNA对照组细胞G0+G1期比例[(32.73±3.09)%]明显低于miR-205组[(43.19±3.12)%],差异有统计学意义(t=2.810,P<0.05)。miRNA对照组细胞S期比例[(34.22±4.17)%]明显高于miR-205组[(24.44±2.95)%],差异有统计学意义(t=2.422,P<0.05)。生物信息学分析结果显示MCT1是miR-205的靶基因。miRNA对照组细胞MCT1相对表达水平(1.09±0.12)明显高于miR-205组(0.48±0.10),差异有统计学意义(t=2.864,P<0.05)。

结论

miR-205通过调控MCT1表达水平,调节细胞内乳酸水平,进而促进了肿瘤细胞增殖。

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