【摘 要】
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目的:探讨自噬在红景天甙诱导人胃癌细胞凋亡中的作用及机制.方法:红景天甙处理人胃癌AGS细胞,Hoechst33342染色观察凋亡形态学变化,流式细胞术检测凋亡细胞数;透射电镜观察
【机 构】
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重庆市公共卫生医疗救治中心,重庆400036
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目的:探讨自噬在红景天甙诱导人胃癌细胞凋亡中的作用及机制.方法:红景天甙处理人胃癌AGS细胞,Hoechst33342染色观察凋亡形态学变化,流式细胞术检测凋亡细胞数;透射电镜观察自噬体形成,mRFP-GFP-LC3转染观察荧光自噬斑点;Western blot观察凋亡蛋白、自噬蛋白及PI3K/AKT/mTOR通路蛋白表达;自噬抑制剂氯喹(CQ)预处理AGS细胞,流式细胞术检测凋亡细胞数,Western blot观察凋亡相关蛋白变化,Hoechst33342染色观察凋亡形态学变化;PI3 K/AKT激动剂胰岛素样生长因子(IGF-1)预处理AGS细胞,mRFP-GFP-LC3转染和Western blot分别观察自噬变化.结果:红景天甙诱导人胃癌AGS细胞自噬体形成,荧光自噬斑点增多,抑制PI3 K/AKT/mTOR通路蛋白活化;CQ预处理胃癌细胞后,细胞凋亡数量显著增加,细胞核固缩现象增强,抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调,促凋亡蛋白Bax、cleaved-Caspase3、cleaved-Caspase9表达上调;IGF-1预处理胃癌细胞明显减弱红景天甙诱导的自噬现象.结论:中药红景天甙可诱导人胃癌AGS细胞自噬,与抑制PI3K/AKT/mTOR通路相关,抑制自噬可促进红景天甙诱导的细胞凋亡.
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