观察猪带绦虫混合重组双歧杆菌(Bb)疫苗免疫仔猪后诱导产生的保护效果。
方法将40 d龄健康仔猪分为实验组和对照组,每组4头。实验组以1011菌落形成单位(CFU)重组Bb-TSO45W-4B疫苗和重组Bb-TSOL18疫苗,按1∶1混合后灌胃免疫,间隔2周免疫1次,共免疫2次;对照组以Bb液体培养基(MRS)50 ml灌胃。在免疫后不同时间点(0、2、4、6、8周)取前腔静脉血,分离血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清IgG水平。末次免疫4周后用猪带绦虫卵进行攻击,感染3个月后剖杀仔猪,分离囊尾蚴,计算减蚴率;取前腔静脉血,分离血清和制备外周血淋巴细胞(PBMC),采用ELISA法检测血清IgG、IgG1、IgG2a水平和PBMC培养上清液白细胞介素(IL)-2、干扰素(IFN)-γ、IL-4及IL-10水平;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测PBMC增殖水平。
结果实验组血清IgG水平在首次免疫后2~8周升高,在4周达较高水平,与对照组比较,差异有统计学意义(mg/L:270.64 ± 1.94比207.74 ± 2.24,t= 42.479,P < 0.05)。攻击感染3个月后,实验组减蚴率为80.48%;实验组与对照组比较,血清IgG、IgG2a水平显著升高,IgG1水平显著降低(mg/L:364.15 ± 11.52比245.94 ± 8.81,89.74 ± 1.13比62.61 ± 0.84,20.52 ± 1.00比34.11 ± 0.65,t= 16.303、38.579、-22.772,P均< 0.05);PBMC培养上清液IL-2、IFN-γ水平显著升高,IL-4、IL-10水平显著降低(ng/L:215.24 ± 3.31比174.19 ± 2.14,28.21 ± 0.27比17.69 ± 0.28,40.35 ± 0.34比52.57 ± 0.29,71.34 ± 0.36比94.82 ± 0.45,t= 20.839、53.623、-54.743、-81.266,P均< 0.05);PBMC增殖水平显著升高(0.620 ± 0.051比0.242 ± 0.053,t= 10.259,P < 0.05)。
结论猪带绦虫混合重组Bb疫苗可诱导仔猪产生一定的保护力,Th1型免疫应答在保护性免疫机制中起重要作用。