【摘 要】
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多形汉逊酵母可以利用甲醇作为唯一的碳源和能量来源,是构建微生物细胞工厂的潜在宿主,在代谢工程改造和重组蛋白生产中引起了广泛关注.在合成生物学研究和代谢工程改造过程中,通常需要改变相关基因的转录水平来调节代谢通量,而这一过程需要借助不同种类、不同表达强度的启动子来实现.因此,对汉逊酵母糖酵解途径和活性氧(ROS)防御途径相关基因启动子进行挖掘,将其与GFPuv融合,通过测定荧光值的大小,分析汉逊酵母中相关启动子对不同碳源的响应情况及其表达强度.结果 发现:在汉逊酵母中,含有多种不同强度的甲醇诱导型和组成型启
【机 构】
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中国科学院大连化学物理研究所,辽宁大连116023;中国科学院大学,北京100049;中国科学院大连化学物理研究所,辽宁大连116023
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多形汉逊酵母可以利用甲醇作为唯一的碳源和能量来源,是构建微生物细胞工厂的潜在宿主,在代谢工程改造和重组蛋白生产中引起了广泛关注.在合成生物学研究和代谢工程改造过程中,通常需要改变相关基因的转录水平来调节代谢通量,而这一过程需要借助不同种类、不同表达强度的启动子来实现.因此,对汉逊酵母糖酵解途径和活性氧(ROS)防御途径相关基因启动子进行挖掘,将其与GFPuv融合,通过测定荧光值的大小,分析汉逊酵母中相关启动子对不同碳源的响应情况及其表达强度.结果 发现:在汉逊酵母中,含有多种不同强度的甲醇诱导型和组成型启动子,包括:强甲醇诱导型启动子PsoDI,强组成型启动子PADH2-1和PGAP;中等强度甲醇诱导型启动子PPGM2、PsoD3和PsoD2,中等强度组成型启动予PPFK2、PGpi和PADH2-2;弱甲醇诱导型启动子PGSH、PMSR和弱组成型启动子PPGM1、PSOD4和PGPX.这一研究结果将促进多形汉逊酵母在代谢工程改造和相关基础研究中的应用,为实现汉逊酵母细胞工厂提供理论依据.
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