【摘 要】
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目的探讨核因子-κB(NF-κB)圈套对大鼠Kupper细胞(KCs)活化的抑制作用及其机制.方法分离大鼠KCs并随机分为3组:正常对照组、内毒素(LPS)刺激组及NF-κB圈套组,后者KCs在LPS
【机 构】
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四川,重庆医科大学附属第二医院肝胆外科
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目的探讨核因子-κB(NF-κB)圈套对大鼠Kupper细胞(KCs)活化的抑制作用及其机制.方法分离大鼠KCs并随机分为3组:正常对照组、内毒素(LPS)刺激组及NF-κB圈套组,后者KCs在LPS刺激前转染NF-κB圈套.除对照组外,两个实验组培养液中加入终浓度为1 mg/L的LPS.于LPS刺激6 h后,凝胶电迁移率改变分析法(EMSA)检测NF-κB蛋白结合活性,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测KCs膜表面CD80 mRNA表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养上清肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6表达情况.结果转染NF-κB圈套可以高效抑制KCs激活,EMSA结果显示NF-κB活性仅为LPS组的0.53,RT-PCR结果显示KCs CD80mRNA表达仅为LPS组的0.46,ELISA结果显示培养上清TNF-α表达量仅为LPS组的0.37,IL-6仅为LPS组的0.60.结论NF-κB圈套可以高效抑制NF-κB的转录活性,降低KCs膜表面共刺激分子和细胞因子的产生,为活体内应用NF-κB圈套提供了可靠的实验依据.
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