【摘 要】
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目的:研究miR-125b-5p对人血管瘤内皮细胞HemECs增殖、凋亡的影响.方法:RT-qPCR检测人血管瘤内皮细胞HemECs及其旁系组织细胞中miR-125b-5p与MCL-1 mRNA的表达;选取HemECs细
【机 构】
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延安市人民医院肿瘤血液科,陕西延安716000
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目的:研究miR-125b-5p对人血管瘤内皮细胞HemECs增殖、凋亡的影响.方法:RT-qPCR检测人血管瘤内皮细胞HemECs及其旁系组织细胞中miR-125b-5p与MCL-1 mRNA的表达;选取HemECs细胞分为对照组、miR-NC 组、miR-125b-5p mimic 组、miR-125b-5p inhibitor 组、pc-MCL-1 组、miR-125b-5p+pc-MCL-1 组,每组设9复孔.将 100 nmol·L-1 的 miR-NC、miR-125b-5p mimic、miR-125b-5p inhibitor、pc-MCL-1 质粒分别或联合转染进入HemECs细胞.MTT法检测HemECs细胞增殖;流式细胞术检测HemECs细胞凋亡;双荧光素酶报告检测靶向关系;蛋白印迹法检测 Ki67、PCNA、cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2、p-p70s6k/p70s6k、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR 蛋白相对表达水平.结果:通过比较miR-125b-5p在血管瘤组织和细胞中的表达水平,选择下调效果比较明显的HemECs细胞系进行后续实验.与对照组相比,miR-125b-5p mimic组HemECs细胞增殖及Ki67和PCNA表达明显减少(P＜0.01),细胞凋亡率及cleaved Caspase-3、Bax表达明显升高、Bcl-2表达明显降低(P＜0.01),p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR、p-p70S6K/p70S6K 表达明显下调(P＜0.01);miR-125b-5p inhibitor 组 HemECs 细胞增殖及 Ki67和PCNA表达明显增加(P＜0.01),细胞凋亡率及cleaved Caspase-3、Bax表达明显降低、Bcl-2表达升高(P＜0.05,PP＜0.01).miR-125b-5p 靶向下调 MCL-1.与 miR-125b-5p mimic 组相比,miR-125b-5p+pc-MCL-1 组 HemECs 细胞增殖及Ki67和PCNA表达明显增加(P＜0.01),细胞凋亡率及cleaved Caspase-3、Bax表达明显降低、Bcl-2表达明显升高(P＜0.01),p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR、p-p70S6K/p70S6K 表达明显上调(P＜0.01).结论:miR-125b-5p 抑制人血管瘤内皮细胞增殖、诱导细胞凋亡,其机制可能与靶向下调MCL-1表达,抑制AKT/mTOR通路激活等有关.
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