【摘 要】
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大丽轮枝菌是引起棉花、马铃薯等重要作物黄萎病的土传病原真菌,其分泌的胞外蛋白是侵染寄主的重要毒力因子,因此研究胞外蛋白与寄主的相互作用具有重要意义.本研究旨在构建
【机 构】
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重庆师范大学生命科学学院,重庆401331;中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京100193
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大丽轮枝菌是引起棉花、马铃薯等重要作物黄萎病的土传病原真菌,其分泌的胞外蛋白是侵染寄主的重要毒力因子,因此研究胞外蛋白与寄主的相互作用具有重要意义.本研究旨在构建高效的棉花酵母双杂交cDNA文库,并通过已知大丽轮枝菌效应子VCR1互作蛋白的筛选来评价构建文库的质量.分别采用大丽轮枝菌及茉莉酸甲酯、水杨酸和乙烯处理海岛棉'海7124'以诱导其抗病基因表达,混合RNA样品构建酵母双杂交cDNA文库,文库滴度达1.18×108 cfu/mL,检测重组率100％,插入片段在300～2 000 bp之间.以效应子VCR1为诱饵筛选获得27个潜在互作蛋白,并进一步确证了1个与VCR1互作的靶标蛋白.本研究构建的酵母双杂交文库将为筛选与大丽轮枝菌效应子互作的蛋白及后续互作机理研究提供重要的研究基础.
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