【摘 要】
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背景与目的:磷酸丝氨酸磷酸化酶(PSPH)在多种肿瘤中表达上调,发挥促进肿瘤生长和转移的作用,但其在肝细胞癌(HCC)中的作用尚未完全清楚.因此,本研究旨在探讨PSPH在HCC中的表达与作用及其作用机制.方法:分别用Western blot和qRT-PCR检测PSPH在HCC组织和癌旁组织中以及不同HCC细胞株(HepG2、Huh-7、HCCLM3)与正常肝细胞株(HL-7702)中的表达.HepG2细胞过表达或敲低PSPH后,分别用CCK-8、EdU染色、Transwell侵袭实验及Western bl
【机 构】
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达州职业技术学院,四川达州635000;达州职业技术学院附属医院外科,四川达州635000;中国人民解放军空军军医大学第二附属医院肿瘤科,陕西西安710038
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背景与目的:磷酸丝氨酸磷酸化酶(PSPH)在多种肿瘤中表达上调,发挥促进肿瘤生长和转移的作用,但其在肝细胞癌(HCC)中的作用尚未完全清楚.因此,本研究旨在探讨PSPH在HCC中的表达与作用及其作用机制.方法:分别用Western blot和qRT-PCR检测PSPH在HCC组织和癌旁组织中以及不同HCC细胞株(HepG2、Huh-7、HCCLM3)与正常肝细胞株(HL-7702)中的表达.HepG2细胞过表达或敲低PSPH后,分别用CCK-8、EdU染色、Transwell侵袭实验及Western blot法检测PSPH对HepG2细胞增殖、侵袭以及细胞增殖标记蛋白CCND1和Ki-67表达的变化;同时,用Western blot法检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62以及侵袭相关蛋白MMP-9的表达,用免疫荧光法检测p65蛋白入核情况.结果:与癌旁组织比较,HCC组织中PSPH蛋白的表达明显上调;与正常肝细胞比较,各HCC细胞株中的PSPH基因的表达明显升高(均P＜0.05).过表达PSPH后,HepG2细胞的增殖和侵袭能力明显增强,CCND1和Ki-67的表达明显上调,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达上调而p62表达下调,p65蛋白核转位明显增加,MMP-9表达明显上调(均P＜0.05);敲低PSPH后,HepG2细胞的上述指标均呈相反变化(均P＜0.05).NF-κB通路抑制剂能抑制过表达PSPH对p65入核的促进作用和对MMP-9的上调作用,而NF-κB通路激动剂能逆转敲低shikonin对p65入核的抑制作用和对MMP-9的下调作用(均P＜0.05).结论:TNF-α在HCC中表达上调,PSPH高表达能增强HCC细胞增殖与转移能力,其作用机制可能涉及对自噬的抑制作用以及对NF-κB/MMP-9信号通路的活化作用.
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