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肥胖MC4R重组腺病毒表达载体的构建及鉴定

来源 :山东医药 | 被引量 : 0次 | 上传用户：hyxh4388488

【摘 要】

：

目的构建黑素皮质素受体-4（MC4R）重组腺病毒表达载体,为肥胖症的基因治疗研究奠定基础。方法 PCR扩增犬MC4R目的基因后与T载体连接,双酶切鉴定正确的T-A载体获得具有黏性末端的

【作 者】

：

王玉彬 吕金钢 苏荣健 王光川 巴彩凤 

【机 构】

：

辽宁医学院附属第一医院,辽宁医学院实验动物中心,辽宁医学院省高校分子细胞生物学与新药开发重点实验室

【出 处】

：

山东医药

【发表日期】

：

2011年15期

【关键词】

：

肥胖 黑素皮质素受体-4 同源重组 腺病毒载体 

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目的构建黑素皮质素受体-4（MC4R）重组腺病毒表达载体,为肥胖症的基因治疗研究奠定基础。方法 PCR扩增犬MC4R目的基因后与T载体连接,双酶切鉴定正确的T-A载体获得具有黏性末端的MC4R目的基因;将其亚克隆至腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV中,构建穿梭载体pShuttle-CMV/MC4R;PmeⅠ单酶切pshuttle-CMV/犬MC4R后,转化到含pAdeasy-1的BJ5183感受态细胞,采用细菌内同源重组法构建腺病毒载体pAdeasy-1/pshuttle-CMV/MC4R;筛选阳性克

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