【摘 要】
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目的 研究FK506促进许旺细胞体外增殖及对许旺细胞(SOs)分泌NGF的影响. 方法 将纯化的许旺细胞分6组:A组(空白对照组):含10%胎牛血清的DMEM/F12;B组:0.1 ng/mlFK506;C组:0.5
【机 构】
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沙井人民医院创伤治疗康复中心,深圳市,518104南方医科大学临床解剖学研究所;
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目的 研究FK506促进许旺细胞体外增殖及对许旺细胞(SOs)分泌NGF的影响. 方法 将纯化的许旺细胞分6组:A组(空白对照组):含10%胎牛血清的DMEM/F12;B组:0.1 ng/mlFK506;C组:0.5 ng/ml FK506;D组:1.0 ng/ml FK506;E组:5.0 ng/mk FK506;F组:10 ng/ml FK506.将许旺细胞于倒置显微镜下观察并用S-100蛋白免疫组化染色鉴定;MTT法筛选FK506促SCs增殖的最佳作用浓度;流式细胞仪检测SCs周期;ELISA法检测培养72 h后SCs的NGF的分泌量. 结果 MTT法筛选:0.5 ng/ml FK506为促进SCs增殖的最佳作用浓度;当FK506浓度大于1.0 ng/ml时,SCs的生长活性逐渐下降并随着FK506浓度的逐渐增高,SCs的生长活性受抑制作用逐渐加强.流式细胞仪检测:含10%胎牛血清的DMEM/F12培养24 h、48 h、72 h,SCs S期百分比分别为:27.8%,39.3%和58.4%;0.5 ng/mlFK506培养24 h、48 h、72 h,SCs S期百分比分别为:54.2%、60.3%和94.6%.EUSA法检测FK506促SCs增殖后表达NGF的实验研究中发现:0.5 ng/ml FK506作用72 h后的SCs所分泌的NGF高达0.188 ng/ml. 结论 FK506应用于体外培养的SCs初期就能促进SCs增殖并使其保持良好的活性而高分泌NGF.
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