【摘 要】
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实验旨在建立快速检测驴、马和狐狸源性成分的方法。以驴、马和狐狸的线粒体保守序列16S r RNA基因为靶基因,设计通用引物和以不同荧光素标记的特异Taq Man探针,构建与通用引
【机 构】
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山东省农业科学院生物技术研究中心山东省农业科学院应用生命科学实验室; 山东省食品药品检验研究院; 山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室;
【基金项目】
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山东省农业重大应用技术创新课题(鲁财农指[2014]38号);山东省科技厅山东省优秀中青年科学家科研奖励基金计划项目(BS2010SW024);济南市高校院所自主创新项目(201401264)
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实验旨在建立快速检测驴、马和狐狸源性成分的方法。以驴、马和狐狸的线粒体保守序列16S r RNA基因为靶基因,设计通用引物和以不同荧光素标记的特异Taq Man探针,构建与通用引物共用的阳性扩增内标(Internal Amplification Control,IAC)作为PCR监控反应体系。通过优化PCR反应体系和条件,建立能同时检测驴、马和狐狸源性成分的四重实时荧光PCR方法。结果表明:利用驴、马、狐狸、牛、猪、羊、水貂、狗、鸡、鸭、大豆、小麦、玉米等物种检测没有交叉反应,证明该方法特异性高,准确性好。该方法模板DNA检测灵敏度为0.01 ng。本研究建立的驴、马和狐狸源性四重荧光实时PCR检测体系灵敏度高、特异性强,能有效鉴别动物产品中驴、马和狐狸的源性成分,也可用作相关动物皮张真伪的鉴别方法。
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