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构建可行的MICB(major histocompatibility complex class Ⅰ chain-related gene B)基因原核表达系统及蛋白质纯化体系，利用表达纯化蛋白建立ELISA方法初步应用于肾移植患者中MICB抗体的检测。
方法外周血RNA经RT-PCR和特异性引物扩增获得MICB基因cDNA，MICB cDNA和原核表达载体pET-28a分别双酶切后连接构建重组表达载体，转染宿主菌E.coli BL21 DE3，IPTG诱导表达。亲和层析的Ni-NTA Spin纯化蛋白质，并通过Western blot鉴定。利用纯化蛋白建立ELISA法检测肾移植患者中MICB抗体。
结果构建3个MICB常见等位基因2、3外显子的pET-28a-MICB重组表达体系，经Ni-NTA Spin纯化获得重组的MICB蛋白，Western blot鉴定。利用3个不同MICB蛋白质成功构建了ELISA方法，初步检测24份肾移植患者标本MICB抗体，显示不同的重组蛋白敏感性存在差异。
结论本研究建立MICB基因克隆与体外表达技术，鉴定并纯化具有生物活性的蛋白质，同时建立MICB抗体检测的ELISA方法，为进一步研究MICB与移植免疫的关系提供基础资料。