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目的：研究绿色荧光蛋白（GFP）基因在小鼠胚胎干细胞系R1中表达的影响因素。方法：构建3个不同的GFP真核表达载体，并从转录、蛋白表达水平比较了它们整合于宿主细胞染色体中的表达效率。结果：在GFP蛋白表达水平上，含肽链延长因子(EF)启动子的表达载体和所转染的克隆明显高于含CMV启动子及含双拷贝CMV-GFP表达单元的表达载体；而pCMV-GFP和pdCMV-GFP所转染的克隆之间无显著差别；NIH3T3和ES细胞之间比较，GFP的表达水平无显著差异。转录水平与蛋白质水平的测定结果相一致。结论：（1）在N