【摘 要】
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目的 探讨circ_0000745对结直肠癌细胞增殖及转移的影响及其可能的作用机制.方法 收集2013年3月～2016年7月在四川省人民医院确诊的结直肠癌及癌旁组织65例,采用实时定量PCR(qRT-PCR)法检测结直肠癌组织、癌旁组织中circ_0000745与miR-296-5p表达,分析circ_0000745与miR-296-5p表达与结直肠癌患者预后的关系.将人结直肠癌细胞HCT-116分为si-NC组、si-circ_0000745组、miR-NC组、miR-296-5p过表达组、si-cir
【机 构】
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四川省人民医院 胃肠外科 成都610072;四川省人民医院 肿瘤科 成都610072
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目的 探讨circ_0000745对结直肠癌细胞增殖及转移的影响及其可能的作用机制.方法 收集2013年3月～2016年7月在四川省人民医院确诊的结直肠癌及癌旁组织65例,采用实时定量PCR(qRT-PCR)法检测结直肠癌组织、癌旁组织中circ_0000745与miR-296-5p表达,分析circ_0000745与miR-296-5p表达与结直肠癌患者预后的关系.将人结直肠癌细胞HCT-116分为si-NC组、si-circ_0000745组、miR-NC组、miR-296-5p过表达组、si-circ_0000745+an-ti-miR-NC组、si-circ_0000745+anti-miR-296-5p组;采用CCK-8法、平板克隆形成实验、Transwell实验分别检测各组细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭;采用双荧光素酶报告实验检测circ_0000745与miR-296-5p的靶向关系;采用Western blot法检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达量.结果 与癌旁组织比较,结直肠癌组织中circ_0000745的表达升高(P<0.05),miR-296-5p的表达降低(P<0.05);随访5年,65例患者中死亡9例,存活56例,与存活患者相比,死亡患者的circ_0000745明显增高(P<0.05),miR-296-5p明显降低(P<0.05).与HT-29细胞相比,HCT-116细胞的circ_0000745 mRNA表达升高(P<0.05),miR-296-5p的表达降低(P<0.05),选择HCT-116细胞进行下一步研究.与si-NC组比较,si-circ_0000745组细胞存活率、M M P-2、M M P-9蛋白、细胞克隆形成数、迁移及侵袭细胞数减少(均P<0.05);circ_0000745可靶向调控miR-296-5p的表达;与miR-NC组比较,miR-296-5p过表达组细胞存活率、MMP-2、MMP-9蛋白、细胞克隆形成数、迁移及侵袭细胞数减少(均P<0.05);与si-circ_0000745+anti-miR-NC组比较,si-circ_0000745+anti-miR-296-5p组细胞存活率、M M P-2、M M P-9蛋白水平、细胞克隆形成数、迁移及侵袭细胞数增多(均P<0.05).结论 结直肠癌组织中circ_0000745呈高表达,miR-296-5p呈低表达,高表达circ_0000745及低表达miR-296-5p可用于评估结直肠癌患者预后,circ_0000745通过靶向miR-296-5p促进结直肠癌细胞增殖及转移,沉默circ_0000745可为结直肠癌治疗提供新思路.
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