核因子κB在缺氧微环境中对胰腺癌细胞上皮-间质转化调控作用的实验研究

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目的 探讨缺氧条件下核因子(NF) κB对胰腺癌细胞上皮-间质转化的调控作用.方法 在常氧和缺氧条件下培养人胰腺癌细胞株BxPC-3和Panc-1,分为常氧组和缺氧组.通过光镜观察细胞形态学变化,通过Western blot法检测上皮标志物和间质标志物蛋白表达,通过Western blot 法和电泳凝胶迁移实验检测NF-κB P65的蛋白表达和DNA结合活性,通过Transwell小室观察细胞迁移侵袭能力,通过cell counting kit-8法检测细胞生存率.分别采用药物及siRNA法抑制缺氧细胞NF-κB P65表达后,重复检测上述指标.结果 胰腺癌细胞在缺氧条件下培养48 h后,细胞失去多边形,获得纺锤形态,细胞间黏附减少并出现伪足,迁移侵袭能力增强,对吉西他滨药物敏感性下降,上皮标志物蛋白表达下调,间质标志物蛋白表达上调,NF-κB P65蛋白表达和DNA结合活性升高;阻断缺氧细胞NF-κB P65表达后可逆转上述现象.结论缺氧可能通过上调胰腺癌细胞NF-κB P65活性,调控上皮-间质转化相关蛋白表达,增强其迁移侵袭能力,降低对吉西他滨的药物敏感性.
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