兔肾上皮细胞cDNA表达文库的建立

来源 :中国动物传染病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong539
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为筛选兔瘟病毒在兔肾上皮细胞(rabbit kidney epithelial cells,RK13)上的受体,从RK13细胞中提取基因组总RNA,然后用链霉亲和素磁珠(SA—PMP)纯化mRNA,再用SMART(Switching methanism at 5′end of RNA transcript)技术合成cDNA第1链。采用长距离PCR(long-distance—PCR,LD—PCR)方法扩增双链cDNA,经纯化后克隆到真核表达载体pEXP—Lb中。最后,电转化宿主菌(DH5α),构建了RK1
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