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目的: 建立能区分美洲型PRRSV经典与高致病毒株的RT-PCR检测方法。方法:根据GenBank登录的经典与高致病性PRRSVNsp2序列，设计了1对引物，所扩增的序列包含高致病毒株缺失部分，对应DL2000分子标准区分经典与高致病毒株，并对扩增条件进行了优化。结果:应用该方法，从经典与高致病性PRRSV基因组中分别能扩增出573和483bp的特异性片段，病毒基因组混合后能够同时扩增;并可以检测出1.8TCID50/100μl经典毒株及0.6TCID50/100μl高致病毒株的病毒RNA;对CSFV、JPV.PEDV、TGEV、RV、PPV、PRV，PCV-2等常见猪病毒病病原的鉴别诊断均为阴性;对分离的8株PRRSV进行检测，3株为经典毒株，5株为高致病毒株;对采集的59份确诊病料进行了检测，21份为经典毒株感染，38份为高致病毒株感染。结论: 本研究建立的RT-PCR诊断方法，具有特异、灵敏、快速等特点，通过DL2000分子标准即可区分PRRSV经典与高致病毒株。