Sphk1抑制剂PF543对宫颈癌SiHa细胞凋亡和增殖的影响及其机制

来源 :武汉大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:shanzhaokai
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目的:研究鞘氨醇激酶1(Sphk1)抑制剂PF543对宫颈癌SiHa细胞凋亡和增殖的影响.方法:体外培养SiHa细胞,并分为SiHa、SiHa+20 μmol/L PF543和SiHa+40 μmol/L PF543三组,分别采用流式细胞实验检测细胞凋亡和细胞周期情况,CCK-8实验和Edu实验检测细胞增殖能力,RT-PCR和Western Blot实验检测各组Sphk1、Caspase3、Bax、Bcl-2、Ki67和Cyclin D1 的表达情况.结果:与 SiHa组相比,20和40 μmol/L PF543组均可增加 Bax和 cleaved-Caspase3表达,抑制 Sphk1、Bcl-2、Cyclin D1 和 Ki67的表达,具有剂量依赖性(P<0.05),而总 Caspase3蛋白表达无明显变化;同时,20和40 μmol/L PF543组细胞活率逐渐下降,显微镜下红色荧光占比逐渐减少(P<0.05).流式细胞实验中,随着PF543浓度的增加,细胞凋亡率逐渐升高,G,期细胞占比逐渐增加,S期占比逐渐减少(P<0.05).结论:PF543下调Sphk1后促进SiHa细胞凋亡、阻滞细胞于G1期和抑制细胞增殖.这可能与增加促凋亡基因cleaved-Caspase3和Bax表达,抑制抗凋亡基因Bcl-2和促增殖基因Ki67、CyclinD1表达有关.
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