牦牛IFN—γ基因的表达及其产物的生物学活性分析

来源 :中国兽医科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：tianfong

【摘要】

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用植物血凝素和脂多糖诱导牦牛外周血淋巴细胞，提取细胞总RNA，利用RT—PCR技术克隆了牦牛IFN-γ，（YakIFN-γ）基因，然后设计了1对表达引物，从pGEM—YakIFN-γ载体上扩增YakIFNy成熟蛋

【作者】

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王生富窦永喜陈国华贾怀杰房永祥景志忠

【机构】

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中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

【出处】

：

中国兽医科学

【发表日期】

：

2008年11期

【关键词】

：

牦牛 IFN-Γ 基因表达生物学活性 yak interferon-γ gene expression bioactivity

【基金项目】

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国家高技术研究发展计划（863）项目（2006AA10A203）,甘肃省农业生物技术专项（GNSW07-11）,兰州市科技项目（06-2-23）

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用植物血凝素和脂多糖诱导牦牛外周血淋巴细胞，提取细胞总RNA，利用RT—PCR技术克隆了牦牛IFN-γ，（YakIFN-γ）基因，然后设计了1对表达引物，从pGEM—YakIFN-γ载体上扩增YakIFNy成熟蛋白基因，将牦牛IFN-γ基因与表达载体pET-30a连接，构建了重组表达质粒pET-30-YakIFN-γ。用IPTG诱导表达的可溶性表达产物经镍柱亲和纯化，用纯化的重组YakIFN-γ蛋白进行了MTT、抑制肿瘤细胞增殖和细胞病变抑制的生物学特性研究。结果显示，成功克隆和表达了YakIFN-γ，基

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