HBX基因逆转录病毒载体的构建及在LO_2细胞内的稳定表达

来源 :南方医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：William_hui

【摘要】

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目的构建乙型肝炎病毒X基因（HBX）逆转录病毒载体,并使其在人正常肝细胞LO2内的进行稳定表达。方法 PCR扩增HBX基因,克隆到逆转录病毒载体质粒pSEB-Flag中,构建表达HBX的重组逆

【作者】

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张婷赵迎泽罗进勇卢晓娟文巍冯涛

【机构】

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重庆医科大学临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心

【出处】

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南方医科大学学报

【发表日期】

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2010年7期

【关键词】

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HBX LO2 逆转录病毒肝癌 HBx LO2 human hepatocytes retrovirus hepatocelular carcinoma

【基金项目】

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国家自然科学基金（30771925）

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目的构建乙型肝炎病毒X基因（HBX）逆转录病毒载体,并使其在人正常肝细胞LO2内的进行稳定表达。方法 PCR扩增HBX基因,克隆到逆转录病毒载体质粒pSEB-Flag中,构建表达HBX的重组逆转录病毒载体质粒pSEB-Flag-HBX,通过通过PCR、酶切、测序验证HBX基因后;体外将重组质粒pSEB-Flag-HBX与包装质粒pAmpho共同转染人胚胎肾上皮细胞系293T细胞,包装获得携带HBX基因的重组逆转录病毒,并感染靶细胞人正常肝细胞LO2,稻瘟菌素（Blasticidin）筛选,获得成功转入HB

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