MKK6 p38α信号通路在机械牵张诱导肺泡上皮细胞表达晚期糖基化终末产物受体中的作用

来源 :中华危重病急救医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Hotcoolman
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目的 探讨p38α及其上游激酶丝裂素活化蛋白激酶6(MKK6)在机械牵张诱导肺泡上皮细胞(A549)表达晚期糖基化终末产物受体(RAGE)中的作用.方法 应用阳离子脂质体DOTAP介导的基因转染方法将p38α显性无活性突变体p38α(AF)+绿色荧光表达载体pGFP及MKK6b的组成性活性突变体MKK6b(E)+pGFP分别导入A549细胞,以质粒pcDNA3+pGFP作为阴性对照,以pGFP作为空白对照.应用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测转染基因.建立体外细胞牵张应变模型,观察各组细胞在施加20%牵张应变时p38激酶活性变化及RAGE的蛋白和mRNA表达变化.结果 Western blotting检测结果显示,外源基因成功转染A549细胞,并在细胞内表达.在A549细胞牵张应变模型中观察到,MKK6b(E)转染细胞内p38激酶活性明显升高,而p38α(AF)转染细胞内p38激酶活性显著下降;MKK6b(E)基因转染可促进20%牵张应变诱导A549细胞RAGE的蛋白和mRNA表达,而p38α(AF)基因转染则抑制牵引应变诱导的RAGE蛋白和mRNA表达.结论 牵张应变通过MKK6 p38α信号通路调节A549细胞RAGE的表达。

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