【摘 要】
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目的 建立酶联免疫吸附法(ELISA)以检测海洋真菌多糖YS4108发酵过程中抗肿瘤多糖(YCP)的含量. 方法 以CDAP(1-氰基-4-二甲胺吡啶四氟硼酸盐)为交联剂制备YCP-BSA偶联产物,利
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)
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目的 建立酶联免疫吸附法(ELISA)以检测海洋真菌多糖YS4108发酵过程中抗肿瘤多糖(YCP)的含量. 方法 以CDAP(1-氰基-4-二甲胺吡啶四氟硼酸盐)为交联剂制备YCP-BSA偶联产物,利用该偶联产物为包被抗原,YCP为竞争抗原,两者与定量的YCP-McAb反应,建立栓测YCP的间接竞争ELISA测定法. 结果 最佳抗原包被浓度为2.5 mg/L,最佳单抗工作浓度为1:5 000,HRP-抗小鼠IgG工作浓度为1:4 000.得到回归方程lg(B/B0%)=-0.171 8 lgCYCP+1.963 8,r=0.991 6,可测量最适范围为1～1 000μg/L,最小检测量为0.1μg/L,批内和批间RSD分别小于5.45%和8.37%. 结论 建立了快速测定YCP含量的间接竞争ELISA法.
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