宿主细胞erp57基因敲除抑制流感病毒复制的研究

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zhanfeifan

【摘要】

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ERp57是细胞内质网内的蛋白二硫键异构酶家族成员,可以催化蛋白二硫键的合成以促进蛋白折叠。为研究erp57基因敲除对流感病毒复制的影响,本研究通过CRISPR/Cas9技术构建了erp

【作者】

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胡丹王斌冷有龙王玉杰于群郑永辉范春玲

【机构】

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黑龙江八一农垦大学动物科技学院,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所-美国密歇根州立大学天然免疫联合实验室/兽医生物技术国家重点实验室

【出处】

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中国预防兽医学报

【发表日期】

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2016年6期

【关键词】

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erp57 CRISPR/Cas9系统基因敲除流感病毒 erp57 CRISPR/Cas9 system gene knockout influenz

【基金项目】

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国家自然科学基金（31502089）,黑龙江八一农垦大学研究生创新科研项目（YJSCX2015.Y26）,黑龙江省教育厅科学技术研究项目（12541582）,兽医生物技术国家重点实验室自主课题（SKLVBP2015012）

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ERp57是细胞内质网内的蛋白二硫键异构酶家族成员,可以催化蛋白二硫键的合成以促进蛋白折叠。为研究erp57基因敲除对流感病毒复制的影响,本研究通过CRISPR/Cas9技术构建了erp57基因的向导RNA（g RNA）敲除质粒p GEM-erp57g RNA,并将其与p Cas9-EGFP共转染至人肺腺癌细胞A549中,采用流式分选及限制性稀释的方法筛选单细胞克隆株,通过靶基因组测序及western blot检测,筛选获得了erp57基因敲除的A549细胞系。erp57基因敲除细胞系与野生型细胞生长动力

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