【摘 要】
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目的探讨早产儿视网膜病(ROP)差异表达基因，分析其功能通路，丰富ROP发病机制，为ROP防治提供理论依据。方法获取引产胎儿眼球，分离培养视网膜微血管内皮细胞，按照培养基氯化钴(CoCl2)浓度(0、100、150、200、250、300、350 μmol/L)分为7组，并最终利用150 μmol/L CoCl2诱导缺氧制备ROP体外细胞模型。采用Ⅷ因子和CD31抗体荧光染色验证视网膜微血管内皮细
【机 构】
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目的探讨早产儿视网膜病(ROP)差异表达基因，分析其功能通路，丰富ROP发病机制，为ROP防治提供理论依据。
方法获取引产胎儿眼球，分离培养视网膜微血管内皮细胞，按照培养基氯化钴(CoCl2)浓度(0、100、150、200、250、300、350 μmol/L)分为7组，并最终利用150 μmol/L CoCl2诱导缺氧制备ROP体外细胞模型。采用Ⅷ因子和CD31抗体荧光染色验证视网膜微血管内皮细胞，进行RNA提纯，基因芯片杂交，微阵列显著分析软件筛选表达差异基因，基因本体学分析软件研究差异表达基因的功能通路。
结果1.CoCl2≥150 μmol/L，细胞增殖活性开始下降(F＝21，P<0.05)。2.150 μmol/L CoCl2组的二代和三代血管内皮细胞Ⅷ因子抗体染色胞核呈蓝色，胞质为绿色，CD31单克隆抗体染色的血管内皮细胞在胞质中可见红色荧光。无CoCl2组二代和三代血管内皮细胞Ⅷ因子和CD31抗体染色仅见胞核染色，但胞质未见染色。3.人胚视网膜微血管内皮细胞缺氧诱导后326个基因表达存在差异，198个基因表达上调，128个基因表达下调，上调基因表达约是下调基因的1.5倍。4.基因本体学分析软件提示差异基因与细胞缺氧、血管生成抑制、铁离子转运等10个生物过程通路明显相关。
结论CoCl2诱导视网膜微血管内皮细胞缺氧可制备ROP体外细胞模型，ROP存在差异表达基因，细胞缺氧、血管生成抑制、铁离子转运等功能通路可能与ROP发病机制相关。
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