【摘 要】
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目的探讨耳蜗毛细胞的分离方法。方法选出生３周的ＳＤ大白鼠，雌雄兼用，在自制的外淋巴液中取出耳蜗基底膜，置于０．２５ｍｇ／ｍｌ木瓜蛋白酶中，３７℃３０ｍｉｎ消化后，洗去酶液，用钢针在普通解剖镜下剥离毛细胞并置倒置
【机 构】
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上海医科大学眼耳鼻喉科医院耳鼻喉科,中国科学院上海细胞生物研究所
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目的探讨耳蜗毛细胞的分离方法。方法选出生３周的ＳＤ大白鼠，雌雄兼用，在自制的外淋巴液中取出耳蜗基底膜，置于０．２５ｍｇ／ｍｌ木瓜蛋白酶中，３７℃３０ｍｉｎ消化后，洗去酶液，用钢针在普通解剖镜下剥离毛细胞并置倒置相差显微镜下观察，记录成活时间。结果每侧耳蜗可获２００左右成活的毛细胞，５ｈ后仍有７０％的毛细胞成活。结论用自制改良外淋巴液，并简化了操作过程，可以满意地获得形态、功能完好的毛细胞
Objective To investigate the method of separating cochlear hair cells. Methods SD rats of 3 weeks old were selected and used both sexes. The basilar membrane of cochlea was removed from home-made perilymph, placed in 0.25mg / ml papain, digested at 37 ℃ for 30min, Under normal dissecting microscope, the hair cells were peeled off and observed under an inverted phase contrast microscope to record the survival time. The results of each side of the cochlea can be about 200 living hair cells, 5h after 70% of hair cells still survive. CONCLUSIONS: Peripheral lymphatic fluid can be modified by self-made method, and the operation process can be simplified. The hair cells with perfect morphology and function can be satisfactorily obtained
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