【摘 要】
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为实现FurA的表达,探究铁元素对藻生长的影响,首先运用Primer5.0设计引物,克隆出鱼腥藻PCC7120染色体上all 1691(furA)基因片段;构建含组氨酸融合表达标签和T7启动子标签的表达
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31001099/C190101),中央高校自然科学基金项目(CJSl3003,CJSl3004),中南民族大学微生物与生物转化重点实验室项目(XJS09002),“十二五”国家级中南民族大学民族药物实验教学中心建设项目.
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为实现FurA的表达,探究铁元素对藻生长的影响,首先运用Primer5.0设计引物,克隆出鱼腥藻PCC7120染色体上all 1691(furA)基因片段;构建含组氨酸融合表达标签和T7启动子标签的表达载体.IPTG诱导FurA蛋白表达.然后设计不同Fe^3+浓度梯度培养基,利用SDS-PAGE检测高、中、低Fe^3+浓度培养液的藻细胞总蛋白,考马斯亮蓝g-250法测定蛋白含量,并用Trizol法提取不同Fe3+浓度培养的藻细胞总RNA.结果表明,获得纯化的all 1691克隆片段,大小为456 bp,p
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