【摘 要】
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目的 探讨丙酮酸脱氢酶复合物E2亚基(PDC-E2)内硫辛酰区域(ILD)环化后在原发性胆汁性胆管炎(PBC)患者抗线粒体抗体(AMA)检测中的抗原性变化及临床意义.方法 利用质粒pTWIN1提供的内含肽自我剪切技术,构建、表达和纯化环状ILD(cILD),采用Western blot法鉴定线状ILD和cILD的抗原性;选择PBC患者316例、类风湿性关节炎(RA)患者34例及健康对照36例,分别以PDC-E2、线状ILD及cILD为包被抗原,ELISA法比较检测受试者血清中AMA的阳性率.结果 West
【机 构】
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安徽医科大学第一附属医院风湿免疫科,合肥230022;安徽医科大学第一附属医院风湿免疫科,合肥230022;炎症免疫性疾病安徽省实验室(安徽医科大学),合肥230032
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目的 探讨丙酮酸脱氢酶复合物E2亚基(PDC-E2)内硫辛酰区域(ILD)环化后在原发性胆汁性胆管炎(PBC)患者抗线粒体抗体(AMA)检测中的抗原性变化及临床意义.方法 利用质粒pTWIN1提供的内含肽自我剪切技术,构建、表达和纯化环状ILD(cILD),采用Western blot法鉴定线状ILD和cILD的抗原性;选择PBC患者316例、类风湿性关节炎(RA)患者34例及健康对照36例,分别以PDC-E2、线状ILD及cILD为包被抗原,ELISA法比较检测受试者血清中AMA的阳性率.结果 Western blot结果显示,重组获得的线状ILD和cILD蛋白均具有与AMA结合的免疫原性;分别用PDC-E2、线状ILD及cILD为包被抗原,ELISA法检测AMA阳性率分别为93.04％ (294/316)、91.46％ (289/316)和85.76％(271/316),其中,cILD为包被抗原检测AMA阳性率低于PDC-E2检测阳性率(85.76％vs93.04％,P=0.003)和线状ILD检测阳性率(85.76％ vs 91.46％,P=0.024);PDC-E2和线状ILD检测AMA的阳性率差异无统计学意义(93.04％ vs 91.46％,P=0.744).PDC-E2和线状ILD检测AMA均呈阴性的21例PBC患者中,cILD检测出38.10％ (8/21)的AMA阳性率.结论 cILD对AMA的抗原性虽有所下降,但在传统检测AMA呈阴性的PBC患者临床诊断中,可能潜在新的临床实用价值.
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