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目的
评价氢对脓毒症小鼠肠组织Rho相关激酶1(ROCK1)和哺乳动物Dia相关蛋白1(mDia1)表达的影响。
方法雄性C57BL/6小鼠90只,体重20~25 g,6周龄,采用随机数表法,将其分为3组(n=30):对照组(C组)、脓毒症组(S组)和脓毒症+氢组(SH组)。采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备脓毒症模型。SH组于CLP后1和6 h时吸入2%氢气1 h。取20只小鼠观察7 d生存情况;于CLP术后24 h时处死10只小鼠,心脏取血,测定血清二胺氧化酶(DAO)活性,并行血液细菌培养并计数菌落数。取小肠组织,行肠损伤评分,采用免疫组织化学染色法测定ROCK1和mDia1阳性细胞率,并计算ROCK1与mDia1阳性细胞率的比值(ROCK1/mDia1比值);采用免疫荧光染色法测定肠上皮细胞钙粘附蛋白E的表达。
结果与C组比较,S组和SH组生存率降低,血清DAO活性、血液培养菌落数及肠损伤评分升高,肠组织ROCK1阳性细胞率和mDia1阳性细胞率升高,钙粘附蛋白E表达下调,S组ROCK1/mDia1比值升高(P<0.05),SH组ROCK1/mDia1比值差异无统计学意义(P>0.05);与S组比较,SH组生存率升高,血清DAO活性、血液培养菌落数及肠损伤评分降低,肠组织ROCK1阳性细胞率降低,mDia1阳性细胞率升高,ROCK1/mDia1比值降低,钙粘附蛋白E表达上调(P<0.05)。
结论氢改善脓毒症小鼠肠屏障功能的机制可能与下调ROCK1表达,上调mDia1表达,纠正ROCK1/ mDia1比例失衡有关。