传染性法氏囊病毒免疫原基因在毕赤酵母中的高效分泌表达

来源 :中国动物检疫 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a1402070128
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从国内分离的鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)众多流行株中获得超强毒株(vvIBDV),应用RT-PCR方法,扩增得到IBDV主要保护性抗原VP2基因的开放编码框,克隆至巴斯德毕赤酵母表达载体pPICZαA,将该重组质粒pPICZαA-VP2以电转化方法转入毕赤酵母X-33感受态细胞中,通过PCR鉴定、表型筛选和抗生素浓度梯度筛选,获得高拷贝阳性重组酵母菌株X-33-pPICZαA-VP2。经摇瓶诱导表达试验获得稳定高效分泌表达的酵母工程菌,表达量为0.459mg/ml,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)
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