【摘 要】
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目的 探讨抗真菌肽-1 A(MAF-1 A)对白念珠菌(Candida albicans)细胞膜的作用机制.方法 取C.albicans冻存物划线接种、培养并制备成浓度为2×109 cfu/L的菌悬液;分别以0、625、1250及2500 mg/L的MAF-1 A作用12 h,采用荧光探针法及激光共聚焦扫描显微技术观察MAF-1 A对C.albicans细胞膜完整性和通透性的影响;以0和1250 mg/L的MAF-1 A分别作用细胞24 h,通过qPCR技术检测MAF-1 A对C.albicans细胞膜麦
【机 构】
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贵州医科大学 基础医学院,贵州 贵阳 550025;贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室,贵州 贵阳 550025;贵州医科大学 基础医学院,贵州 贵阳 550025
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目的 探讨抗真菌肽-1 A(MAF-1 A)对白念珠菌(Candida albicans)细胞膜的作用机制.方法 取C.albicans冻存物划线接种、培养并制备成浓度为2×109 cfu/L的菌悬液;分别以0、625、1250及2500 mg/L的MAF-1 A作用12 h,采用荧光探针法及激光共聚焦扫描显微技术观察MAF-1 A对C.albicans细胞膜完整性和通透性的影响;以0和1250 mg/L的MAF-1 A分别作用细胞24 h,通过qPCR技术检测MAF-1 A对C.albicans细胞膜麦角甾醇合成相关基因(ERG1、ERG6、ERG5、MET6)mRNA表达水平的影响.结果 与对照组(MAF-1 A为0)相比,不同浓度MAF-1 A作用C.albicans 12 h之后,荧光染料PI可透过细胞膜进入到胞质内,C.albicans细胞膜的通透性增加,且细胞膜通透性随MAF-1 A作用浓度的升高而增加,呈剂量依赖性;qPCR结果 显示,MAF-1 A可使C.albicans麦角甾醇合成相关基因ERG1、ERG6、ERG5、MET6的mRNA表达水平下调(P<0.05).结论 MAF-1 A可增加C.albicans细胞膜通透性,其机制可能与抑制细胞膜麦角甾醇合成相关基因mRNA的表达有关.
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