小肠类器官的构建及传代培养

来源 :中国比较医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：CHENHUANHUAN7

【摘要】

：

目的探索小肠隐窝分离,小肠类器官培养、传代、冻存、复苏和蛋白提取的方法,研究R-Spondin1的浓度对小肠类器官成熟的影响。方法分离小鼠小肠隐窝,在模拟体内肠道干细胞生长

【作者】

：

郭正昌赵泽玉张宗耀周翔周波

【机构】

：

安徽医科大学第一附属医院普外科

【出处】

：

中国比较医学杂志

【发表日期】

：

2021年1期

【关键词】

：

肠上皮细胞类器官三维细胞培养干细胞小鼠 intestinal epithelial cell organoids 3D cell culture ste

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目(81801952),安徽省自然科学基金项目(1708085QH199)

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目的探索小肠隐窝分离,小肠类器官培养、传代、冻存、复苏和蛋白提取的方法,研究R-Spondin1的浓度对小肠类器官成熟的影响。方法分离小鼠小肠隐窝,在模拟体内肠道干细胞生长、增殖的体外3D培养体系中培养,倒置显微镜观察小肠类器官的形成过程。用1 mL注射器切割小肠类器官进行传代。设置R-Spondin1浓度梯度,在不同时间点比较小肠类器官形态。结果成功的完成了小肠类器官的分离培养、传代、冻存、复苏及蛋白提取工作。确定了隐窝与单细胞可以进行培养的比例标准且发现在R-Spondin1浓度低于0.5μg/mL的

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