研究重度烧伤小鼠脾脏凝溶胶蛋白(GSN)含量和mRNA表达及T淋巴细胞增殖活性的变化,选择GSN的最佳干预时间。
方法取80只雄性BALB/c小鼠,按随机数字表法分为假伤组和烧伤组,每组40只。烧伤组小鼠造成背部15%TBSAⅢ度烫伤(下称烧伤),伤后即刻皮下注射生理盐水1 mL,背部涂适量碘伏防治感染,每日1次。假伤组小鼠致假伤,伤后不补液、不外涂碘伏。分别于伤后0(即刻)、8、24、48、72 h,每组各取8只小鼠,无菌留取脾脏,噻唑蓝比色法检测脾脏T淋巴细胞增殖活性,ELISA法检测脾脏组织中GSN含量,实时荧光定量RT-PCR法检测脾脏组织中GSN mRNA表达。对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、LSD检验及Bonferroni校正。
结果(1)2组小鼠伤后0 h的脾脏T淋巴细胞增殖活性无明显差异(P>0.05),假伤组小鼠伤后8、24、48、72 h脾脏T淋巴细胞增殖活性显著高于烧伤组(P值均小于0.05)。假伤组小鼠伤后各时相点脾脏T淋巴细胞增殖活性无明显差异(F=0.756,P>0.05);烧伤组小鼠伤后8 h脾脏T淋巴细胞增殖活性为0.12±0.04,显著低于组内伤后0、24、48、72 h的0.73±0.07、0.56±0.07、0.51±0.09、0.59±0.07(P值均小于0.05)。(2)2组小鼠伤后0 h脾脏组织中GSN含量无明显差异(P>0.05),假伤组小鼠伤后8、24、48、72 h脾脏组织中GSN含量显著高于烧伤组(P值均小于0.05)。假伤组小鼠伤后各时相点脾脏组织中GSN含量无明显差异(F=1.083,P>0.05);烧伤组小鼠伤后8 h脾脏组织中GSN含量为(11.9±2.6)pg/mg,显著低于组内伤后0、24、48、72 h的(37.7±2.9)、(19.9±4.0)、(24.1±4.1)、(24.6±4.0)pg/mg(P值均小于0.05)。(3)2组小鼠伤后0 h脾脏组织中GSN mRNA表达量无明显差异(P>0.05),假伤组小鼠伤后8、24、48、72 h脾脏组织中GSN mRNA表达量显著高于烧伤组(P值均小于0.05)。假伤组小鼠伤后各时相点脾脏组织中GSN mRNA表达量无明显差异(F=0.413,P>0.05);烧伤组小鼠伤后8 h脾脏组织中GSN mRNA表达量为0.307±0.064,显著低于组内伤后0、24、48、72 h的0.944±0.023、0.625±0.091、0.744±0.104、0.821±0.072(P值均小于0.05)。
结论重度烧伤可导致小鼠脾脏GSN含量及mRNA表达、T淋巴细胞增殖活性显著下降,且三者均是在伤后8 h降至最低,可选择伤后8 h之前作为重度烧伤后GSN的最佳干预时间。